Dans cet article, vous apprendrez à préparer une culture liquide à base de sirop et d’H2O2. L’ajout d’H2O2 permet une meilleure « résistance » aux contaminations. Vous devez utiliser un sirop alimentaire sans conservateur, contenant un mélange de sirop de glucose-fructose.
Remplissez vos récipients en verre en mesurant la quantité exact d’eau dans chaque bocal. Dans cet exemple, les quantités d’eau sont: 250mL, 250mL, 250mL, 200mL, 150mL
Versez du sirop dans un verre et aspirez le avec une seringue,
puis ajoutez le sirop dans chaque bocal: Il faut qu’il y est environ 5% de sirop dans chaque culture liquide:
pour les pots de 250ml j’ai donc ajouté 12,5mL de sirop, pour le pot de 200mL 10mL de sirop et pour le pot de 150mL, 7,5mL de sirop.
Recouvrez chaque pot avec une ou deux feuilles d’aluminium,
puis effectuez une stérilisation de 30 minutes.
Lorsque vos pots ont refroidis,
retirez les feuilles d’aluminium.
Versez un peu d’H2O2 (concentration à 3% ou 10 volumes) dans un verre,
puis aspirer l’H2O2 avec une seringue munie d’une aiguille.
Désinfectez le port d’inoculation de votre pot avec un peu d’alcool à 70°,
avant d’injecter l’H2O2 dans votre culture liquide. Vous devez ajouter entre 6mL et 12mL d’H2O2 à 3% pour un litre de culture liquide. Dans cet exemple, j’ai ajouté 3mL d’H2O2 pour les pots contenant 250mL, 2,4mL d’H2O2 pour le pot de 200ml et 1,8mL d’H2O2 pour le pot de 150mL.
Vos cultures liquides à l’H2O2 sont maintenant prêtes à être inoculées.
Vous pouvez les inoculer soit avec une gélose nutritive,
soit avec un morceau de tissu de champignon ou une seringue de mycélium.
Vous pouvez acheter tout le matériel nécessaire à la préparation d’une culture liquide dans votre boutique.
Autres articles à consulter:
- Comment préparer une gélose nutritive additionné d'H2O2?
- Propagation du mycélium sur carton
- Utilisation du peroxyde d'hydrogène dans la culture des champignons
(2 commentaires)
Romain
6 juin 2013 à 15 h 39 min (UTC 1) Lier vers ce commentaire
Bonjour,et tout d’abord merci pour votre site,qui est très utile,pour les champiculteurs débutants,j’aimerais une précision concernant la CL a L’H2O2,est ce possible d’inoculer avec des spores en solution (seringue de spores),merci d’avance pour votre réponse.
Samuel
10 juin 2013 à 15 h 53 min (UTC 1) Lier vers ce commentaire
Bonjour Romain,
Merci pour tes félicitations pour le site. Pour les cultures liquides à l’H2O2 tu ne peux pas inoculer avec une seringue de spores, elles seront détruites par l’H2O2. Il faut inoculer avec du mycélium qui lui est capable de résister à l’H2O2.