Comment réaliser une culture liquide ?

Préparation:

Pour faire une culture liquide vous devez commencer par préparer votre récipient et votre mélange d’eau sucrée comme expliqué dans l’article: Qu’est ce qu’une culture liquide de mycélium?

Stérilisation:

Une fois que vos récipients sont prêts vous devez les stériliser:

-Fermez les couvercles de vos pots et posez-les dans le panier de l’autocuiseur.

-Allumez le feu et comptez 20 à 25 minutes après le sifflement de la soupape de l’autocuiseur puis coupez le feu.

-Retirer la soupape pour faire redescendre la pression et laissez refroidir vos pots jusqu’à ce qu’ils soient à température ambiante.

Inoculation:

Cette étape doit être réaliser avec  un maximum de stérilité afin de lutter contre les vecteurs de contaminations. Comme vos pots sont étanches et ont été stérilisés, il se crée un vide à l’intérieur. Vos pots produiront un « claquement » à l’ouverture et de l’air contaminé peut être aspiré. Pour évitez cela vous pouvez injecter de l’air stérile avec une seringue par le bouchon de silicone (voir l’article: Qu’est ce qu’une culture liquide?).

Pour remplir votre seringue d’air stérile, il vous suffit d’aspirer lorsque l’aiguille est rougie par une flamme. Si vous n’avez pas réalisé de bouchon en silicone je vous recommande d’ouvrir le couvercle avec un mouchoir imbibé d’alcool et de refermé aussi tôt que le vide est compensé.

Vous pouvez inoculer votre culture liquide avec:

-chauffez le tour de votre pot à la flamme.

-dévissez le couvercle SANS l’ouvrir.

-chauffez la lame de votre scalpel et laissez la refroidir avant de gratter l’empreinte de spores jusqu’à obtenir un petit dépôt.

-Soulevez rapidement le couvercle et déposez les spores qui se trouvent sur votre lame de scalpel puis refermez le couvercle.

Une fois votre culture liquide inoculée il ne vous reste plus qu’à la mettre dans votre incubateur et attendre que le mycélium se développe et forme une sorte de nuage visqueux.

Utilisation:

-Secouez vivement votre récipient de culture liquide afin de « casser » le mycélium en petits morceaux.

-Aspirez la culture avec une seringue dont vous aurez chauffé l’aiguille  (du plus gros diamètre possible pour que le mycélium puisse passer) à la flamme (laisser refroidir avant d’aspirer)

-Utilisez votre mycélium comme une seringue de spores.

Conservation:

Lorsque le mycélium arrête de se développer, vous pouvez conserver votre culture liquide au frigo (plus d’une année).

Vous pouvez commander des seringues, aiguilles et d’autres ustensiles de culture dans votre boutique.

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Autres articles à consulter:

  • Comment inoculer un milieu de culture en gélose?
  • Comment faire une seringue de spores?
  • Qu'est-ce qu'une culture liquide de mycélium?
Samuel

View Comments

  • je veux simplement te dire mille merci et bravo pour tout le travail que tu fais , un travail minutieux et d'une extrème clarté , et cela ,pour moi,explique ta grande générosité .
    bravo SAM.

  • Bonjour SAMUEL

    Le du site sur mon PC, c 'est vraiment un petit trésor pour moi. Bien je n 'ai pas encore tenté une des ces expériences de votre site, toute fois sa m 'intéresse beaucoup.
    D 'ici là, je vais m 'équipé pour faire mon propre expérience.
    Je suis africain, les champignon, nous les avons des toutes sorte et nous en raffolons. Il ne me reste qu' à appliquer ces techniques et je vous promets qu 'il y a de quoi s'occuper à la retraite.

    Merci une fois de plus.

    Gédéon NGONZALA

  • Bonjour, je suis vraiment interesse a realiser ma culture liquide mais vous ne preciser pas quand le liquide est introduit dans le recipient? Est-il sterelise avec le recipient ou introduit apres.

  • Bonjour,
    Je possède 240 chênes,5ans avec brûli, truffiers uncinatum.
    Je plante des glands pour continuer la plantation, et à ce propos, j'aimerai savoir si je peux directement mycorhizer avec la seringue ,les plants en formation avec une culture liquide de truffe uncinatum, merci pour votre réponse.
    Cordialement
    Joseph Hinz

    • Bonjour Joseph,
      Bravo pour ta chêneraie, c'est déjà une belle exploitation j'imagine!
      Par contre j'ai aucune expérience sur les mycorhizes pour l'instant. Comme j'ai de plus en plus d'emails et de commentaires en rapport avec la truffe je pense acheter quelques ouvrages spécialisés prochainement. Pour réaliser un essai de mycorhize je pense qu'il faudrait:
      -désinfecter un gland le mieux possible
      -stériliser un substrat peu nutritif ayant une bonne rétention d'eau (fibre de coco? carton? coton?)
      -Faire germer le gland dans ce substrat
      -Injecter une culture liquide dans le substrat aux premiers signes de germination du gland
      -Transplanter le gland germé dans la chênerais
      Je ne peux te garantir que cela fonctionne, c'est juste des suppositions. Je n'ai jamais essayer de produire du mycélium de truffe pour le moment.

  • Bonjour,

    je compte me lancer dans la culture lors de mes prochaines vacances ;)

    j'ai juste une question :) une fois le mélange sucre/eau et la seringue strérilisée, je met comment mon petit morceau de champignon dans mon pot ??? je le preleve avec ma seringue et le met au travers du trou en silicone ????

    merci et bravo pour le site super complet ;)

    • Bonjour Chloé,
      Pour inoculer une culture liquide à partir d'un champignon, je prélève à l'aide d'un scalpel un morceau de tissus comme pour réaliser un clonage puis je le dépose en ouvrant le couvercle. Cette manipulation doit être réalisée dans le cône de stérilité de la flamme d'un bec bunsen ou d'une gazinière. Les cultures liquides sont très sensibles aux contaminations et les conditions d'asepsie sont importantes pour la réussite de cette manipulation. Je pense qu'il doit être possible d'effectuer une sorte de "carotte" avec l'aiguille de la seringue pour prélever le morceau de champignon. Veilles cependant à ne pas prélever un morceau de tissu en contact avec l'extérieur (prélève bien dans la chair du pied ou du chapeau). Merci pour tes compliments sur le site ;)
      Bon courage pour tes essais!

  • Cher Samuel serait-il possible de transférer un nuage de mycélium (encore jeune) dans une autre CL car j ai mi du sirop d'érable à la place de sirop, mais et cela fais environ 3 jours que le nuage ne grossit quasiment pas.
    Merci de me répondre le plus rapidement possible

    • Bonjour,
      Tu peux essayer d'aspirer (stérilement) un morceau de ce nuage avec une seringue munie d'une aiguille (sans ouvrir le pot, pour éviter les contaminations), puis inoculer une autre culture liquide avec ta seringue de mycélium. Si le nuage ne grossit plus, il se peut que le mycélium est consommé tout les sucres disponibles mais il se peut aussi qu'il y ai une contamination.
      Bon courage pour ton essai!

  • moi ce qui m'intéresse le plus ce sont les champignons de paris.
    pour les pleurotes je crois que ce n'est pas la saison .mais le principe ,pour la culture du mycélium doit être le même à moins que je ne me trompe.je n'ai jamais compris ce que veut dire le mot l'agar-agar.et trouver une seringue en pharmacie sans que l'on vous regarde de travers ce n'est pas évident. merci d'avoir lu mon message.je suis à vous communiquer le résultat de toutes mes expériences. Un bonjour à tous les membres du site.

    • Bonjour Linda,
      Tu as bien compris, le principe pour produire le mycélium est le même. Par contre, pour obtenir la fructification chaque espèce à ses propres besoins et le champignon de Paris requièrent un couche de gobetage (difficulté supplémentaire: risque de contamination de la culture) mais aussi un substrat composté (pas évident à préparer). L'agar-agar est une algue qui a un fort pouvoir gélifiant et permet de faire des géloses nutritives. Bon courage pour tes essais!

    • Bonsoir,
      Toutes les connaissances de base figure justement sur ce site. D'autres lecteurs débutants ont réussi à faire des essais concluants. Je vous recommande de commencer par une culture de pleurote sur paille. N'hésitez pas si vous avez besoin d'aide!

  • Samuel, je vois que vous n'avez pas répondu à ma question
    es ce que vous auriez un site, qui explique le mode de reproduction de c'est champignon, ainsi que leur cycle de vie ?

    pour le moment, lorsque je recherche le mot truffe, je ne trouve que les truffes noires ou blanches, celles qui valent de l'or.
    ce qui m'interesse, c'est toutes les autres !

    je me demandais si toutes les truffes ont besoins d'un arbre comme support ?
    es ce qu'elles ont toutes besoins de minimum 1 an pour se former ?
    y a t"il d'autres truffes qui se mangent ? (sans causer des troubles ou autre comme la précédente nommée)

    es t'il possible d'en cultiver en intererieur comme l'on fait avec les champignon de paris par exemple ?

    comment fait t'on pour récolter les spores si ils en ont ?
    ou la culture liquide est elle le seul moyen d'arriver à un résultat ?

    merci encore Samuel de votre patience et de votre compréhension pour ce qui n'est que de la curiosité.

  • en faite, pour le genre Sclerotia Galindoi, ce qui me turlupine le plus, ce n'est pas le fait qu'il soit hallucinogéne, mais le fait qu'il ne fasse pas de spore ..
    du coup, je suis perdu dans son mode de reproduction, et je n'arrive pas à comprendre ...

    je n'arrive pas non plus à comprendre comment il fait pour coloniser un substrat ...

    j'imagine que ce champignon doit avoir les memes qualités que la truffe, mais qui; elle, prend plus de temps à se développer, ou qui a besoins d'une certaine bactérie ...

    enfin, vous voyez l'étendue des dégats, expliquez moi svp, le process de développement de c'est champignons si particuliers ...

    merci beaucoup !

    • Bonsoir Guillaume,
      J'ai effectué une petite recherche sur cette espèce, et les sclérotes sont juste un mode de reproduction. Cette espèce est capable de produire un carpophore. Je te recommande la lecture de l'article sur les sclérotes que j'ai publié ce matin. Cette espèce est différente des truffes comestibles qui vivent en symbiose avec les racines d'un arbre (voir champignon mycorhizien).

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Samuel

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